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NanoDrop 2000分光光度計采用的工作原理特性是哪些?
點擊次數:7785 更新時間:2019-04-23
   NanoDrop 2000分光光度計的原理是分子中某些基團吸收紫外可見輻射后,電子能級躍遷產生的吸收光譜。由于各種材料不同的分子、原子和不同的分子空間結構,光能量的吸收,它不會是相同的結果,每個材料都有其*的、固定的吸收光譜曲線,根據一些特征吸收光譜波長的吸光度的歧視或確定材料的內容,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
 
  NanoDrop 2000分光光度計原理使用說明
 
  (1)預熱是保證儀器精度和穩定性的重要步驟。
 
  (2)試管的潔凈度直接影響實驗結果。因此,洗碗是特別重要的。用自來水反復沖洗用過的小杯,再用蒸餾水沖洗,倒立在濾紙上,晾干后放回小杯盒中。如有必要,對對比色盤進行更細致的處理,如用濃硝酸或鉻酸洗液浸泡,沖洗干凈。
 
  (3)試管與分光光度計應同時使用,否則會造成較大的實驗誤差。不能用刀代替1.37200光柵分光光度計。
 
  (4)彩皿中的液體應達到其容量的2/3,太少會影響實驗結果,太多會在測量過程中容易溢出并污染儀器。試管內的樣品裝載量應在2/3和3/4之間。
 
  (5)在操作小杯時,應抓住“粗糙表面”,防止與“光滑表面”接觸而通過光路。如果小杯表面有液體,用絲綢布擦干,以確保不會影響平滑的路徑。
 
  (6)待測溶液濃度過高時,應選用光徑較短的試管。吸光度讀數一般應在0.1 ~ 0.8之間。由于毛坯的測量、標準和溶液的測試使用的是相同光徑的試管,所以不需要考慮光徑變化所帶來的影響。
 
  在NanoDrop 2000分光光度計的測定過程中,發現同一溶液在不同時間的測定結果不同,即重復性不佳。造成這種差異的原因是什么?除判斷錯誤的因素外,可能的原因如下:
 
  1、可見光分光光度計預熱時間不夠或預熱方法不正確,應延長預熱時間或使用正確的預熱方法。
 
  2、由于長期使用,光電變換器的光電轉換效率發生了變化。此時標準溶液和待測溶液的吸光度均降低,在相對定量的情況下對結果影響不大。但是,對于這類儀器,一般建議連續使用時間不超過3h,如果需要較長時間,間歇使用30min。
 
  NanoDrop 2000分光光度計的其他問題
 
  1、發現在測量過程中一些不良操作不利于儀器的維護,用戶應盡量避免。如對上述儀器進行操作(如澆注溶液);吸收器置于儀器的表面板上。在實驗室中與不同儀器的吸收罐混合使用。
 
  2、防塵防潮,分光光度計NanoDrop 2000一般采用塑料布蓋,不使用時將整個儀器蓋住,是一種很好的防塵方法。然而,我發現很多實驗室并不需要附加一個塑料布蓋,但是我使用的是普通的布蓋或由布蓋制成的儀器,除塵效果不如塑料布蓋理想。此外,在塑料布蓋上只放幾袋防潮硅膠,也能更好地發揮延長防潮效果。在防潮時,如果可見分光光度計帶有防潮干燥筒,應經常檢查,發現變色后立即更換新的或待干燥后再使用。
 
  NanoDrop 2000分光光度計種類繁多,但有三種類型:簡單型、中等類型和類型。選擇分光光度計時需要考慮以下幾個方面:
 
  1、波長檢測范圍和波長選擇方法:儀器波長檢測范圍越寬,價格越高,當然用戶需要根據自己的需要選擇合適的波長范圍;對于簡單的儀器,波長的選擇方法一般是手工搜索,這種重復性較差,儀器中的波長可以根據自動搜索或掃描的方式設置,第二種類型的波長掃描速度齒輪也會增加。
 
  2、梁式:梁式可分為單梁式、雙梁式或準雙梁式。單光束一般適用于測量給定波長的吸光度,不能用于全光譜掃描。雙光束可自動記錄,快速全波段掃描。它可以消除光源不穩定、探測器靈敏度變化等因素的影響,特別適用于結構分析;偽雙光束的優點是可以監測光源變化引起的誤差。其原理是將同一單色儀發出的光分為兩束,一束直接到達檢測器,另一束通過樣品后到達檢測器。但是,這種方法并沒有消除引用的影響。
 
  3、光源:鎢絲燈和鹵鎢燈(320 ~ 2500nm)主要用于可見光區;紫外區主要采用氫燈和氘燈(180-375nm)。氙氣燈可作為紫外和可見光的光源。
 
  4、樣本支持:簡單樣本支持為推拉四連桿池框架,一次只能測量一個樣本,基準和樣本兩次測量;樣品池支架的類型為兩種固定類型,分別為樣品通道和參考通道,可以同時測量參考和樣品的吸光值。
 
  5、狹縫:簡單的狹縫類型一般為定寬模式,狹縫寬度大多為2nm,或1.5nm;該儀器的狹縫是連續可調的,可適應高分辨率的需要。
 
  6、光學性能指標:光學性能的好壞直接影響測量的精度,其中光柵的技術指標尤為重要。光柵質量較好,一般光柵為凹面光柵,與大尺寸凹面光柵對應的凹面光柵槽數較多,因此分辨率和雜散光指數優于簡單儀器。
 
  7、檢測器:檢測器是將光信號通過溶液轉換成電信號,利用光電效應放大電信號的裝置。簡單儀器一般采用光電二極管;中間型儀器采用硅光電二極管;I型儀器使用高靈敏度光電倍增管和紅外探測器。
 
  8、顯示:簡易儀器大多為機械表頭或數碼管顯示,無數據處理器;儀器顯示為液晶顯示或與計算機連接,數據處理可由儀器本身或外部計算機進行。
 
  9、測量方式:NanoDrop 2000分光光度計主要是定點(固定波長)吸光度或透射率測量,波長掃描測量基本不可能;可顯示透射率、吸光度、濃度直讀、單光束、單點掃描。
 
  10、測量附件:測量儀器質量的一個重要方面是看儀器是否有豐富的輔助測量設備,如偏振附件、積分球附件、反射附件、自動采樣器附件、色度分析軟件、薄膜附件等。
 
  11、被測樣品狀態:NanoDrop 2000分光光度計一般測量液體樣品,紅外分光光度計一般可以分析各種狀態的樣品(氣體、液體和固體)。
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