NCTC 1469 小鼠正常肝細(xì)胞

細(xì)胞具體情況介紹：

細(xì)胞名稱                       NCTC 1469 小鼠正常肝細(xì)胞

來源                              ATCC 細(xì)胞庫

種屬                              小鼠

組織                              肝

生長特性                        貼壁

成瘤情況                       未成瘤

建議使用培養(yǎng)基             

龍躍細(xì)胞庫簡介：

我公司自有高品質(zhì)進(jìn)口來源細(xì)胞庫， 所有細(xì)胞來源為進(jìn)口母細(xì)胞， 經(jīng)過永生化處理制成傳代細(xì)胞株， 保證為國內(nèi)高品質(zhì)傳代細(xì)胞株。

另外我們有專門的工程師負(fù)責(zé)售后維護(hù)工作， 保證您購買細(xì)胞沒有后顧之憂，  如果對細(xì)胞品質(zhì)不滿意可以無條件退款或免費(fèi)重新發(fā)貨，直到滿意為止。

 細(xì)胞處理方法

以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。

一．貼壁細(xì)胞

1. 客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
5. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)。

二．懸浮細(xì)胞

1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。

3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)

維修 PCR/酶標(biāo)儀/所有實(shí)驗(yàn)室儀器

我公司維修站目前國內(nèi)有上海和北京兩個(gè)站點(diǎn)  （ 北京和上?？梢耘蓪Ｈ松祥T檢測儀器并運(yùn)往維修站， 也可以發(fā)快遞我公司 ）， 免費(fèi)檢查，  找到問題后報(bào)價(jià)維修， 如果報(bào)價(jià)后您覺得價(jià)格高的話可以不修（我們負(fù)責(zé)把機(jī)器原樣寄回）

實(shí)驗(yàn)室儀器維修， 包括PCR， 酶標(biāo)儀， 離心機(jī)，分析儀器，天平，水分計(jì)等

從事維修工作的工程師有長達(dá)20年的工作經(jīng)驗(yàn)，  可勝任幾乎所有常規(guī)實(shí)驗(yàn)室儀器的維修及校準(zhǔn)等工作， 大熒光定量PCR， DNA測序儀，小到水分計(jì)都可以維修

細(xì)胞培養(yǎng)小課堂 

細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長增殖等。

注意事項(xiàng)

編輯

（1）*次開始培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)，一定要用該細(xì)胞的名稱進(jìn)行檢索，可以得到關(guān)于該細(xì)胞的詳細(xì)信息，包括需要使用的培養(yǎng)基、血清、添加劑、通常的消化時(shí)間、傳代時(shí)間等。對于特定的細(xì)胞（如原代培養(yǎng)的細(xì)胞），需要查閱相關(guān)文獻(xiàn)來獲得更準(zhǔn)確的培養(yǎng)方法。

（2）進(jìn)入細(xì)胞間開始細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，必須嚴(yán)格按照下列步驟操作：

①確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測沒有問題，不確定的溶液和耗材請勿使用，除非特殊情況，不要借用別人的溶液。

②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。

③確定酒精燈內(nèi)的酒精量，需要的話及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)充。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋，實(shí)驗(yàn)開始前可以把所有瓶蓋旋松。

⑤盡量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口，請用噴過75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）后在火焰上簡單燒灼。

⑥操作時(shí)如果不能肯定所用的耗材是潔凈的，必須及時(shí)更換。

⑦實(shí)驗(yàn)完畢及時(shí)收拾，保持工作區(qū)域清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。

（3）細(xì)胞污染的預(yù)防

①實(shí)驗(yàn)用品防止污染。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要*，各種溶液滅菌要仔細(xì)，并在無菌實(shí)驗(yàn)檢測陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。

②操作過程防止污染。

③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進(jìn)入細(xì)胞間。

④實(shí)驗(yàn)開始前需要確定戴的手套沒有問題，只要接觸過生物安全柜之外的物品，必須及時(shí)對手套進(jìn)行消毒。

⑤進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)間后關(guān)好門，坐下來盡量少走動(dòng)以免影響生物安全柜的風(fēng)簾。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴(yán)格檢查所用的器材、溶液和細(xì)胞，不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無菌室內(nèi)，更不能隨便使用，以免造成大規(guī)模污染。

⑥細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕，必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口，并將瓶口放在火焰周圍簡單轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。

⑦實(shí)驗(yàn)操作時(shí)生物安全柜的隔板要盡可能放低，盡量減少談話，打噴嚏或咳嗽時(shí)不能對著工作區(qū)，以免造成不必要的污染。

⑧瓶蓋應(yīng)當(dāng)?shù)狗旁谶h(yuǎn)離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染。

⑨不要從敞開的容器口上方經(jīng)過，以避免衣服上掉落不明物體對細(xì)胞的污染。

⑩實(shí)驗(yàn)操作時(shí)要注意及時(shí)更換巴斯德吸管、移液槍槍頭和移液管，切勿一根管子做到底。一旦發(fā)現(xiàn)接觸了非潔凈或者無法確定潔凈的物品必須直接丟棄。實(shí)驗(yàn)完畢應(yīng)及時(shí)收拾，保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。